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              梅里埃鑒定卡用于保存菌種

              發布時間: 2022-04-25  點擊次數: 43次
                梅里埃鑒定卡一般是提取純菌A的基因組DNA,然后PCR擴增16srDNA片段,之后通過一代測序或三代測序檢測16SrDNA的全長,與國際上的數據庫進行Blast比對,默認選取比對結果中相似性高的10位的物種分類信息,之后構建系統發育樹,然后得出樣本A與XX物種的相似性高。
               
                微生物實驗室成功地進行細菌菌種保存對于系統地分析流行菌株的生物學、分子生物學特征和耐藥性的變遷以及對醫院感染病原學調查、新藥臨床研究都十分重要。
               
                把3種鑒定卡直接從-20℃移至35℃,待小孔液體完全融化后,用注射器抽吸出陽性生長孔內的液體,點種于血平板或沙保弱平板,置35℃孵箱內24~48h,復蘇。復蘇菌落經分離培養后對菌株進行鑒定和藥敏試驗,以金黃色葡萄球菌,ATCC25923、大腸埃希菌,ATCC25922、綠膿假單胞菌,ATCC27853作質控。
               
                用鑒定卡和半固體菌種培養基同時保存12株臨床分離菌及3株,ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853標準菌株6個月對照,其中半固體中的菌株定時轉種傳代。結果兩種方法保存菌株的生物學特性均一致。
               
                菌株保存得不成功容易引起菌株的生物學特征改變,甚至是耐藥質粒的丟失而改變細菌的耐藥譜,某些敏感菌株與抗生素結合位點發生突變而形成耐藥。
               
                對生化卡內的細菌反復凍融5次,分離出的細菌效果是相同的,證實保存在生化卡上的菌種可進行多次復活利用,為了保證每次都能成功地復蘇獲得菌株,通過試驗發現,生化卡上的試驗小孔除陽性控制小孔外,其它糖類發酵孔內的細菌均能復活成功,其結果無差異。

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